Préparer une suspension de mitochondries

• Quand : Préparer cette suspension 1 h 30 avant la manip pour que la solution soit bien oxygénée. Elle se conserve 4 h au frais ou avec des glaçons autour.

• Quoi : Utiliser 1 chou-fleur par groupe classe. Choisir 1 chou-fleur très frais, qui ai un bel aspect (feuilles bien vertes autour)!

• Comment : Suspension de mitochondries isolées (environ 800 mL dans un bécher avec de la glace autour, dans un cristallisoir fin (pour l'agitation)):
  • Couper 200 g  de choux fleur
  • Broyer au blender (froid) avec 200 mL de tampon phosphate froid pH=7,4
  • Filtrer avec de la gaze (2 gazes/ entonnoir) et presser un peu
  • Renouveler l'opération 4 fois pour obtenir 800 mL de solution
  • Conserver au frais ou mettre à agiter pour l'oxygénation, avec des glaçons autour.

• A préparer la veille :

- des glaçons

- préparer la solution tampon et la mettre au frais

- mettre au frigo : des béchers, entonnoirs, erlen, les comptes gouttes et flacons utiles au tp, le blender.

Le TP ici