Préparation d'indicateurs colorés

9 Septembre 2022

Biuret - Bleu de bromothymol B.B.T - Bleu de méthylène

Bleu de thymol - Carmin aluné - Carmin acétique

Carmino-vert de Mirande - DNPH - Eau iodée ou lugol

Hélianthine - Liqueur de fehling - Noir ériochrome T

Phénolphtaléine - Potassium chromate - Réactif du biuret

Rouge neutre

Biuret (réactif) :

3 g de sulfate de cuivre (5H2O)
9 g de tartrate de sodium et de potassium
5 g d'iodure de potassium
1 L de soude à 0.2 mol/L

Dissoudre sulfate et tartrate dans 500 mL de la solution de soude. Ajouter l'iodure de potassium. Compléter à 1L avec la solution de soude.

Ce réactif prend une coloration violette en présence de liaison peptidique (jus de pois chiche, blanc d’œuf...)

ou 1 flacon de Cu2+ à 10% et 1 flacon de NaOH à 20%, les élèves utilisent les 2 flacons sur l'échantillon.

Bleu de bromothymol B.B.T 100 mL :

BBT : 0,4 g
alcool 95° : 20 mL
soude 0,1 mol/L : 7,4 mL
eau déminéralisée qsp 100mL

Acide 6 – 7,6 Basique

Bleu de méthylène 1 L :

1 g de bleu de méthylène dans 1000 mL d'eau déminéralisée, bien agiter.

Nettoyage de la verrerie : alcool à bruler

Bleu de thymol :

0.04 g de bleu de thymol dans 100 mL d'éthanol.

Carmin aluné :

Colorant de la cellulose.

Ajouter à 100 mL, 4g d’alun de potasse et 1g de carmin, faire bouillir très doucement un quart d’heure environ, laisser refroidir et filtrer.

Attention la solution peut se contaminer moisissures.

Carmin acétique :

Colorant de la chromatine et du noyau.
Mélanger 55 mL d’eau distillée et 45 mL d’acide acétique cristallisable, porter à ébullition, ajouter du carmin 40 jusqu’à saturation (environ 5 g). Laisser refroidir et filtrer.

Carmin vert d'iode ou carmino-vert de Mirande :

Association du carmin aluné et du vert d’iode. Faire dissoudre 90g de carmin aluné dans 200 mL d’eau distillée, chauffer à feu doux pendant 40 minutes. Laisser reposer 24 heure ; ajouter 1 L d’eau distillée puis dissoudre 2 grammes de vert d’iode, porter à ébullition, laisser refroidir ; ajouter 10g d’acide phénique (phénol), faire bouillir à nouveau, laisser reposer 24 heures puis filtrer.

DNPH (dinitrophenylhydrazine):

0.2 g pour 100 ml d'HCl à 2 mol.L^-1

Eau iodée ou lugol (S.V.T) : flacon brun

Pour des tests en cupule : diiode : 1.10-3mol/L
Pour une coloration de préparation microscopique : diiode : 2.5.10-2 mol/L

Hélianthine : (méthylorange)

Dissoudre 0,2 g d’héliantine dans 1000 mL d’eau distillée chaude. Laisser refroidir et filtrer si besoin.

Liqueur de fehling : Flacon brun

500mL de liqueur de fehling A
500mL de liqueur de fehling B

une fois mélanger la solution ne se conserve pas longtemps!

Noir ériochrome T :

0.5 g de NET dans 100 mL de solution tampon

- Pour le dosage on met 4 à 6 gouttes

Phénolphtaléine (éviter son utilisation!) 100 mL :

0,1 g de phénolphtaléine
50 mL d'alcool
50 mL d'eau déminéralisée( solution hydroalcoolique)

Remplacer par le bleu de thymol.

Acide 8,2 – 12 Basique

Potassium chromate 1 L :

1 g de chromate de potassium dans 1L

Lors du TP, utiliser 10 mL de cet indicateur et non quelques gouttes car pour des raisons de toxicité, il a été dilué de façon plus importante (avant on l'utilisait à 50 g/L)

Réactif du biuret :

1 flacon de Cu2+ à 10% et 1 flacon de NaOH à 20%

Gornall (réactif de) : (méthode biuret)

1.5 g de CuSO4
6 g de tartrate de sodium-potassium
1 g de KI
30 g d'NaOH
qsp 1 L d'eau distillée

Rouge neutre :

Dissoudre 0,1 g de rouge neutre dans 100 ml d'eau à PH 7 (eau de Volvic).

ne se conserve pas longtemps et doit donc être préparé peu de temps à l'avance.

De couleur rouge, il vire au jaune pour un PH > à 8 (colorant de la vacuole, s'utilise sur toutes les cellules végétales)

Recette de quelques indicateurs colorés!

Préparation de colorants en chimie.