Antibiogramme : comment identifier une souche résistante et comment expliquer son apparition?
Le TP : Antibiogramme avec des produits de substitution
Manipulation proposée : La gélose rouge simule un développement bactérien.
Tremper une pastille dans chaque flacon à l'aide d'une pince. Les disposer une après l'autre, sur la gélose à partir du gabarit.
Résultats obtenus : L'acide va réagir avec le colorant et virer au jaune
En fonction de la concentration en acide, l'auréole sera plus ou moins grande.
La souche initiale est sensible à tous les antibiotiques donc les 3 binômes chargés de cette souche auront de l'HCl à 5% dans tous les tubes.
Les autres binomes disposeront de souches ayant mutées et étant donc plus résistantes aux antibiotiques. La concentration en HCl sera donc différentes et plus faibles dans les tubes.
5 flacons notés A, V, C, P et E et rempli en fonction du résultat attendu, (voir photo ci-dessous)
marqueur (je préfère ne pas en mettre et noté la marque sur la boite de pétrie)
pinces fines
pastilles de papier (celles qu'on trouve dans la perforatrice par exemple)
Pissette
Gabarit imprimé
Lunette
Remarques :
Préparation du rouge de phénol : 3 g dans 100 g d'eau
Préparation des boites de pétries : - 3 g d'agar + 200 mL d'eau + 8 gouttes de rouge de phénol. Faire légèrement bouillir et couler 5 mL dans chaque boite.
Flacon :
- HCl à 5 % : préparer à 5 %
- HCl à 2 % : diluer 4 x la préparation à 5 % (car 2% c'est trop)