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TP Term EDS SVT : Le substrat nécessaire à la respiration mitochondriale

 

  • Interface ExAO : (avec leur Ordi : attention installation de Capstone)

    • Enceinte + bouchons

    • Agitateur magnétique

    • Sonde O2 +Airlink : charger avant le TP

  • 2 mL d’une solution de glucose à 20 g.L-1 (MANIP 1)

  • 2 mL d’une solution de Di-sodium Succinate (frigo)

    à 20 g.L-1 (= phosphotriose isomérase) (MANIP2)

  • Compte-gouttes notés sur support tube Sordalab

  • Eau froide

  • bécher 100 mL

     

Matériel prof :
 

  • Suspension de mitochondries isolées (environ 800 mL dans un ballon x 2)

    • Couper les têtes de choux fleur (pour info : 2 choux fleurs = 12 grouppes)

    • Broyer au mixeur 200 g /200mL de t. phosphate froid pH=7,4

    • Filtrer avec 2 gazes superposées et presser un peu

    • Mettre au frigo ou dans un cristallisoir avec des glaçons


 

!! Mettre à oxygéner la suspension 1h30 avant le TP avec l’agitateur magnétique !!

 

  • Tampon phosphate pH 7,4 : 2L

  1. Prendre 800 mL d'eau distillée
  2. Ajouter 16 g de NaCl
  3. Ajouter 0,400 g de Kcl
  4. Ajouter 2,88 g de Na2HPO4
  5. Ajouter 0,490 g de KH2PO4
  6. Ajuster le pH à 7,4 (Na2HPO4 augmente le pH/KH2PO4 diminue le pH)
  7. Compléter avec de l'eau distillé jusqu'à 2L

 

 

  • Au frais : Frigo ou soute à produits

  1. 2 choux-fleurs : couper en morceaux et garder les têtes
  2. Bol du blender
  3. 1 éprouvette de 200 mL
  4. 4 erlens de 250 mL + 4 grands entonnoirs
  5. 2 ballons d'1L
  6. Préparer des glaçons

 

 

 

TP Term EDS SVT : Le substrat nécessaire à la respiration mitochondriale
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