Le TP : Test de Mancini avec des produits de substitution
Manipulation proposée :
Technique d’immunoprécipitation par simple diffusion : l’anticorps est incorporé dans une gélose qui est coulée dans une boîte de façon à obtenir un gel d’épaisseur homogène et de concentration uniforme en anticorps.
Les anticorps sont contenus dans le gel : leur concentration est donc constante.
Une gamme étalon de dilutions d’une solution antigénique de concentration connue est déposée dans une série de puits creusés dans le gel ; l’antigène va donc diffuser en formant un gradient de concentration concentrique (immunodiffusion radiale) décroissant en s’éloignant du puits.
Résultats obtenus : La soude et le zinc vont précipiter en fonction de la concentration en soude, l'auréole sera plus ou moins grande.
Fiche préparateur
Poste professeur :
Gants
Poste élève :
Matériel: -Sérums dedifférentspatients -Fiche technique du dosage des anticorps grâce autest de Mancini -UneboîtedePétriavecgélosecontenantdesantigènes -Untube emporte-pièce et un cure-dent -Unmarqueur (pour marquer la boîte de Pétri) -Uncompte-goutte pour chaque sérum -Unrécipient poubelle -Unepetite feuille de papier noir -Unerègle
Remarques :
Préparation des boites de pétries : - 0.2 g d'agar + 9 mL d'eau + 5 mL de ZnSO4 à 0.5 mol/L.
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